文章目录

1 材料与方法

1.1 主要材料、试剂和仪器

1.2 方法

    1.2.1 藏药翼首草提取物的提取

    1.2.2 细胞培养

    1.2.3 细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验检测细胞活力

    1.2.4 细胞凋亡检测

    1.2.5 细胞周期检测

    1.2.6 荧光qPCR实验

    1.2.7 蛋白质印迹实验

    1.2.8 细胞侵袭实验

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 翼首草提取物对胃癌BGC-823细胞活力的影响

2.2 翼首草提取物对胃癌BGC-823细胞凋亡的影响

2.3 翼首草提取物对胃癌BGC-823细胞周期和细胞增殖的影响

2.4 翼首草提取物对胃癌BGC-823细胞侵袭的影响

3 讨论

文章摘要:目的探讨藏药翼首草提取物对人胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡及侵袭的影响。方法使用70%甲醇提取翼首草中成分。体外培养人胃癌BGC-823细胞,将不同浓度翼首草提取物作用于BGC-823细胞。使用细胞计数试剂盒-8检测翼首草提取物对BGC-823的半数抑制浓度;流式细胞术检测翼首草提取物作用后细胞凋亡和细胞周期情况;荧光定量聚合酶链反应分析翼首草提取物作用后细胞增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）mRNA表达水平;蛋白质印迹法分析翼首草提取物作用后细胞PCNA、Cyclin D1和活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved-Caspase-3）蛋白表达水平;Transwell实验分析翼首草提取物作用后细胞侵袭能力。结果翼首草提取物处理的胃癌BGC-823细胞活力下降,且随着药物浓度的增加抑制作用越明显,作用24 h和48 h对胃癌BGC-823细胞抑制作用的半数抑制浓度分别为（30±8）μg/ml和（21±4）μg/ml,本研究后续分别以10、20、40μg/ml翼首草提取物处理胃癌BGC-823细胞48 h进行实验。10、20、40μg/ml翼首草提取物组胃癌BGC-823细胞凋亡率均明显高于0μg/ml组[（13.13±2.12）%、（13.15±1.29）%、（20.24±0.62）%比（2.91±0.96）%],细胞G₀/G₁期比例明显高于0μg/ml组[（65.0±2.3）%、（68.2±2.9）%、（73.1±1.4）%比（58.1±2.8）%],PCNA和Cyclin D1 mRNA表达水平均低于0μg/ml组[PCNA mRNA:（0.56±0.16）、（0.34±0.15）、（0.22±0.12）比（1.00±0.30）;Cyclin D1 mRNA:（0.38±0.15）、（0.33±0.10）、（0.28±0.12）比（1.00±0.26）]（均P<0.05）。20、40μg/ml翼首草提取物组BGC-823细胞PCNA和Cyclin D1蛋白表达水平和迁移细胞数均低于0μg/ml组,cleaved-Caspase-3蛋白表达水平均高于0μg/ml组（均P<0.05）。结论翼首草提取物处理能抑制人胃癌BGC-823细胞增殖和侵袭,并促进细胞凋亡的发生。

文章关键词:

论文分类号:R29